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我們經(jīng)?？吹皆S多關(guān)于飲水免疫、滴鼻點(diǎn)眼、噴霧免疫等的文章，而很少見(jiàn)到關(guān)于馬立克疫苗的具體免疫接種方法。這可能是由于它是雛雞第一日齡在孵化廳接種的原因，也可能是雞群發(fā)病后大多認為雞舍消毒不徹底造成的早期感染或雞群之間的水平傳播引起的，這樣往往忽視了馬立克疫苗接種的重要性。
我們知道馬立克疫苗品質(zhì)、解凍稀釋及接種過(guò)程、注射器材的消毒方式等都會(huì )影響接種效果。在生產(chǎn)中接種雞群暴發(fā)馬立克疾病的最常見(jiàn)因素為對雛雞注射前的準備工作、疫苗混合及處理方式不當。下面我們詳細介紹各種注意細節，以引起同行的關(guān)注。
1、影響疫苗效價(jià)的因素
疫苗從取出、解凍到與稀釋液的混合，整個(gè)過(guò)程最好在1分鐘內完成，切記不能超過(guò)2分鐘，否則會(huì )致使疫苗效價(jià)完全喪失。所以每次從液氮罐中取疫苗時(shí)，只能取出立刻要用的一瓶，其他疫苗都必須立即全部再放回液氮罐中。
1.1、解凍疫苗的水溫對疫苗效價(jià)有直接影響
水溫在25℃時(shí)，疫苗效價(jià)最高100%，當水溫達到40℃時(shí)，效價(jià)降低到75%，如果水溫降低至18℃時(shí)效價(jià)為80%。所以，我們建議當疫苗從液氮中取出后，應立即放入適當的水溫（18℃~25℃）來(lái)加以解凍。
1.2、在水中解凍時(shí)放置時(shí)間對疫苗效價(jià)的影響
在水中放置30秒，疫苗效價(jià)最高100%,放置5分鐘后效價(jià)降低到83%，放置10分鐘疫苗效價(jià)降低為68%，放置15分鐘降到47%，由此可見(jiàn)隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)疫苗效價(jià)迅速降低。
1.3、稀釋液的溫度對疫苗效價(jià)也會(huì )產(chǎn)生影響
稀釋液保存在室溫條件下，稀釋疫苗后效價(jià)最高100%，如果使用冷凍過(guò)的稀釋液（4℃），疫苗效價(jià)僅為78%，所以稀釋液應當隨時(shí)維持在室溫（18℃~25℃）用于混合疫苗，絕對不可以先冷凍。
1.4、疫苗中添加抗生素
許多孵化場(chǎng)為了防控雛雞早期感染細菌，就在雛雞出場(chǎng)前注射一針抗生素。一般為了節省人工將抗生素加到馬立克疫苗中一起注射進(jìn)去，殊不知有許多種抗生素都對疫苗中的病毒有害，即使是未完全破壞疫苗，所以添加抗生素時(shí)應慎之又慎。
2、稀釋疫苗的操作
2.1、所用工具
每次稀釋疫苗時(shí)都應用全新的塑膠無(wú)菌針管和18G/1.5″針頭，以便將安瓶中的疫苗吸取并注入稀釋液中。同時(shí)馬立克疫苗是活細胞苗如果用其他型號的針頭會(huì )破壞病毒的細胞壁影響疫苗效價(jià)。且不能重復使用一個(gè)針頭，甚至用生銹的針頭，否則疫苗會(huì )被污染。建議一定要用靜脈注射的成套裝置來(lái)稀釋馬立克疫苗，針頭從下面扎入瓶?jì)?，這樣氣泡逐漸往上走，對疫苗稀釋液起到攪拌作用，會(huì )提高疫苗免疫效果。
2.2、操作規程
首先抽取少量的稀釋液到針管中，用于洗滌安瓶，然后抽取稀釋液注入安瓶將疫苗稀釋后再抽出來(lái)注入整瓶稀釋液中，上述過(guò)程至少要重復2~3次，這樣才能將安瓶中剩余的14%疫苗病毒回收起來(lái)。吸取疫苗的動(dòng)作和混合過(guò)程應溫和、輕柔，以免疫苗病毒的細胞壁受到破壞。從疫苗混合到接種完畢，最好在30分鐘內完成，這樣可保留9%的疫苗效價(jià)免受損失。
3、注射器材的消毒
注射器應放在干凈而隔離的地方，不能與不潔的物品或表面接觸，避免潮濕和污染。應經(jīng)常檢查連續注射器是否有漏水，尤其是注射器潴留底板的鈕附近是否會(huì )漏水。
3.1、檢查接種是否正確
許多孵化廳均利用色素或是稀釋液中的顏色來(lái)檢查，即小雞注射部位的絨毛是否有被著(zhù)色，如果有顏色就說(shuō)明接種不恰當、疫苗外漏，這種檢查法也可應用于少量的雞群(100~200只)，來(lái)評估接種失誤的比率是多少。如果靠近接種點(diǎn)的雛雞絨毛是濕的，就表示對這只雛雞沒(méi)有恰當的接種到位。
3.2、注射器的清洗及殺菌
每次接種完畢后應立刻用清水沖洗注射器材，然后分解注射器的所有組成零件，將其浸泡在盤(pán)中,并用中性的清潔劑熱水溶液清洗。最后取出注射器再用干凈的熱水沖洗2遍，以便除去所有殘留的清潔劑。
注射器在滅菌前應用鋁鉑紙輕輕的包好。注射器材應在高溫高壓滅菌鍋中滅菌20~30分鐘。我們有時(shí)采用高壓快鍋來(lái)滅菌，高壓鍋中的水應和滅菌托盤(pán)至少相隔4厘米，這樣器材就是在蒸氣中蒸而不是在滾水中煮了，使用這種高壓快鍋應延長(cháng)滅菌時(shí)間到60分鐘為宜。
3.3、注射器的檢查
每2周或注射20萬(wàn)只雛雞后應將所有的彈簧、閥珠及墊圈等加以更換，我們不能為了省事或節約成本就忽略此項工作，要知道時(shí)常更換新的零件是很重要的，因為可以避免疫苗的漏失，進(jìn)一步可以防止疫苗遭受污染。
4、雛雞的存放
馬立克病毒的主要傳播媒介是上批雞群的毛囊及絨毛屑，如果雛雞接種馬立克疫苗后直接存放在有馬立克病毒的地方，那么疫苗接種效果可能只有30%~40%。因此應將雛雞放在一個(gè)干凈的環(huán)境中，尤其應引起注意的是雛雞舍必須徹底清洗消毒，以避免雛雞受到野毒的感染。雛雞越晚接觸野外病毒，其疫苗的保護力越好。因為墊料的徹底消毒很難做到，建議雛雞入舍時(shí)最好鋪設墊紙，這樣可以推遲雛雞和墊料的接觸時(shí)間，大大降低感染馬立克的機率
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5、蛋內接種
蛋內接種在美國的90年代開(kāi)始并流行,在其他國家沒(méi)有普及。蛋內接種與1日齡皮下接種的成本大致相同，它主要節省在人力資源上。而1日齡接種比蛋內接種較準確。蛋內接種一般是對18天的胚胎接種, 每枚種蛋只注射0.05毫升,并且只可以接種MD/IBD細胞結合疫苗，如果接種凍干MD疫苗無(wú)效。
在進(jìn)行蛋內接種時(shí)應注意以下事項：維護機器正常運行和保養，因為機器上面管子較多，有一條或幾條出錯，哪怕是松動(dòng)了都會(huì )出現較大問(wèn)題。同時(shí)種蛋應大頭朝下放在蛋盤(pán)上，否則機器會(huì )錯位而影響孵化率。調整好種蛋室的溫度和濕度，這樣雖然種蛋在孵化器外面的時(shí)間延長(cháng)了，但不會(huì )受涼，從而保證了較高的孵化率。
在蛋內接種過(guò)程中應不斷搖動(dòng)疫苗瓶，以保持細胞苗混合均勻。由于馬立克疫苗是細胞苗，容易受到外界環(huán)境變化的影響，而致使疫苗效力下降。所以我們在接種過(guò)程中嚴格按照規程來(lái)小心操作，切記給疫苗瓶配備保溫裝置，確保疫苗效價(jià)不受影響。